为什么选择 Auto 2000?
Cellometer Auto 2000 荧光细胞活力分析仪介绍
简单、人性化的操作流程
加入20 µl样本
插入计数板
选择应用 点击计数
30秒内得到结果！
30秒内自动完成细胞计数
Auto 2000通过明场和双荧光通道对细胞进行成像，快速、准确地识别细胞，并自动计算和展示细胞数、浓度、直径以及存活率%。
30秒内完成上样、图片查看、细胞计数和结果读取Auto 2000可以让用户：
- 提高通量
- 提高精确度
- 提高稳定性
- 确保所有数据都正确保存
- 分析不易计数的样本（成团或形状不规则等
- 减少判断错误、错数、红细胞的干扰以及不同用户之间的差异
原代细胞分析：PBMCs、干细胞以及其他
Cellometer Auto 2000专为原代样本分析而设计，适用样本包括外周血、脐带血、骨髓，以及其他复杂样本：
- 移植用有核细胞
- 免疫研究中的PBMCs
- 疫苗开发中的脾细胞
- 细胞治疗中的干细胞
- 肿瘤研究中的肿瘤悬液
通过将活的和死的有核细胞染上不同荧光，排除细胞碎片、血小板和红细胞的干扰，Auto 2000可精确计算细胞存活率。基于对“复杂”和“干净”样本的精确分析，Auto 2000可胜任在细胞处理的多个阶段（细胞收集 – 分离 – 冻存）对细胞状态进行评估。
The Cellometer Auto 2000 的一键式应用选择可分析多种原代样本，包括：
全血分离的有核细胞
分离的PBMCs/脾细胞
干细胞
肿瘤和组织细胞悬液
排除红细胞、血小板或细胞碎片的干扰
AO和PI均是核酸染料。因为大部分成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核，所以只有活的和死的有核细胞才会被染色发出荧光。该方法不需裂解红细胞，能帮助用户节省时间和减少实验步骤。红细胞、血小板和细胞碎片都会在计数时被排除。
荧光染色法计数原代细胞的优势
右边的细胞图片显示了荧光染色法计数原代细胞的优势。明场图片展示了该样本中的有核细胞以及混杂的红细胞和血小板。不过在红色和绿色荧光通道中我们只能看到有核的活/死细胞。| Sample | Measurement | Total nucleated | All | RBC | % RBC | n |
|---|---|---|---|---|---|---|
PBMC+RBC |
Mean |
1.26E+07 |
1.39E+07 |
1.23E+06 |
8.9% |
10 |
|
CV |
6.2% |
8.8% |
|
|
|
PBMC+1/2RBC |
Mean |
1.21E+07 |
1.27E+07 |
5.82E+05 |
4.6% |
10 |
|
CV |
4.8% |
5.4% |
|
|
|
PBMC+1/4RBC |
Mean |
1.22E+07 |
1.24E+07 |
2.27E+05 |
1.8% |
10 |
|
CV |
7.9% |
7.3% |
|
|
|
将不同数量的红细胞与新鲜的人PBMC混合。在明场通道中计数细胞总数(有核细胞 + 红细胞)；在绿色荧光通道中计数有核细胞。不同浓度的红细胞(1.8%, 4.6%和8.9%)没有影响有核细胞的计数。
红细胞在明场图片中被标识出来(左图)；荧光图片只显示发荧光的有核细胞，不显示红细胞(右图)。
成团细胞和形状不规则细胞的分析
NCI-60 细胞系和成团的MCF-7细胞
NCI-60是美国国立卫生研究院(NIH)为药物筛选开发出的59株(原本60株)细胞系。
- NCI-60系列中有57%的细胞系易成团，含有碎片，或形态和大小有较大差异
- 所有59株NCI-60细胞系都在Cellometer细胞计数仪上验证过
成团细胞
MCF-7乳腺癌细胞系非常容易成团。Cellometer的模式识别软件可将细胞团中的细胞精确地分别计数(上图)。
形状不规则细胞
用户可调节Cellometer软件的圆度设置来识别形状不规则的细胞，比如RD细胞和激活的T细胞。简单直观的触屏界面
简单直观的触屏界面显示了多种常见细胞类型。用户可以轻松添加自定义细胞类型。预设模板化设置使得操作和培训都更简单。
用户可以保存新细胞样本的所有参数，在下次计数时一键选择。这样的功能非常适合于同时培养多种细胞类型的实验室。自动保存选项可以让用户快速检测多个样本。
双荧光染色法计数活/死有核细胞
绿色荧光活细胞图片
红色荧光死细胞图片
为什么用双荧光染色法?
仅凭明场下的细胞形态有核和无核细胞难以被区分，而且台盼蓝染色也没有荧光染色对活死细胞的判断灵敏，所以我们强烈建议用双荧光染色法来精确分析原代细胞。Auto 2000细胞计数仪预设了多种用AO/PI双荧光染色法来分析原代细胞的应用。
AO/PI染色法
吖啶橙(AO)是一种核酸染料，可以渗透活细胞和死细胞，将所有有核细胞染色并发出绿色荧光。碘化丙啶(PI)只能渗透破损的细胞膜，将所有有核的死细胞染色并发出红色荧光。当细胞被AO和PI同时染色时，由于这两种染料间的荧光共振能量转移(FRET)，所有活的有核细胞会发出绿色荧光，所有死的有核细胞会发出红色荧光。不含核的细胞或杂质不发荧光。
细胞图像可用于数据确认
没有完全相同的两个细胞
用户可通过Auto 2000的明场通道查看细胞的形态。
被圈定的细胞图片可用于确认细胞图片的获取和分析是否正确。明场图片可用于普通细胞计数和台盼蓝存活率分析。
被圈定的荧光图片显示被计数的有核活/死细胞，可用于确认原代细胞的分析是否准确。
用户可确认：- 基于大小和形态判断细胞计数是否准确
- 成团细胞是否被精确计数
- 红细胞、血小板、碎片是否被排除
明场图片可用于确认粘连的细胞是否都被计数以及碎片是否被排除。在荧光图片中，被计数的活细胞用绿圈标出，被计数的死细胞用红圈标出。
- 细胞图片可被保存和导出并用作文献发表和演示
- 保存的图片可以用默认或自定义参数重新分析
细胞大小分析和基于大小的细胞计数
Auto 2000细胞计数仪会基于细胞直径自动生成细胞大小直方图。
因为Cellometer可生成单个细胞大小的测量结果，所以可将多个样本叠加在一个直方图上，以便分析细胞直径随时间的变化。
针对SF9或SF21细胞相关的实验，保存的细胞图像可以重新调取并计数从而分析细胞形态随时间的变化。
通过设置最小和最大细胞直径可以优化样品中的特定细胞的计数方法。
这个例子展示了根据细胞直径参数计算从PBMC培养的成熟树突细胞的数量。
比人工计数快10倍
使用血球计数板人工计数1 x 106个细胞需要花费大约5分钟的时间。同时计数活细胞和死细胞所需时间会在此基础上加倍。Cellometer Auto 2000可以在30秒内得到活细胞和死细胞的数目和浓度以及存活率%。
提高数据准确性和一致性
- 省略清洗步骤
- 减少判断错误
- 排除红细胞的干扰
- 避免记录和计算错误
- 减少计数时间，提高工作效率
Cellomter准确性
Cellometer Auto 2000拥有优越的可重复性，荧光计数和分析结果的CV%都在10%以内。右边数据显示的是用PI染色后的Jurkat细胞的计数和存活率结果。Sample |
N Value |
Average Live Cell Concentration |
% Viability |
CV of Concentration |
CV of Viability |
|---|---|---|---|---|---|
A |
4 |
4.20E+06 |
91.1 |
10% |
2% |
B |
4 |
1.06E+06 |
22.7 |
7% |
1% |
C |
4 |
3.27E+06 |
57.5 |
7% |
7% |
一次性计数板：无需清洗、无污染
一次性细胞计数板的优点：
- 节省时间 – 无需清洗
- 无交叉污染的风险
- 降低了对用户的生物危害风险
- 样品体积可控
- 针对大细胞有更深更宽的计数板
- 最为实惠的自动细胞计数仪耗材
自动保存数据和细胞图像
Auto 2000用户可将细胞图片和数据自动保存到指定文件夹。自动保存功能可确保所有数据都保存到正确的位置。该功能也可让用户更快速地检测样本。
用户可通过设置使每个新样本都重新命名，也可通过自动命名进一步缩短分析时间。用户还可以选择在每个文件名后自动添加时间标签。
专业的在线和现场技术应用支持
- 创建新的细胞类型
- 计数参数的优化
- 故障排除
- 培训新用户
- Cellometer Auto 2000新仪器装机
Cellometer Auto 2000软件界面右下角的帮助按钮可让用户直接访问：
- 软件功能和说明书
- 在线教程和培训视频
- 提交技术支持申请
所有的Nexcelom应用科学家都100％专注于基于成像原理的细胞计数方法和实验应用。
Nexcelom应用科学家可以支持：
- 现场演示
- 培训
- 故障排除
- 技术研讨会
